Hep-G2人肝癌细胞：
HepG2来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体；该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
下面给大家介绍下经常培养的Hep-G2的生长特点和可能会遇到的问题。
1.生长特性
上皮样呈片状的小岛形态：
叠加成堆：
HeP-G2细胞容易抱团聚集叠加生长，如下图，遇到这样的情况应该怎么处理呢？
2.常见问题
叠加生长：
HeP-G2细胞生长特性是紧密连接成片状从四周延展增值,形成一座座的小岛状，细胞在增值过程中可能会看到轻微的白色小点形成，属于正常现象，细胞在胰酶消化时成片状细胞脱落，这时可稍微延长一点消化时间让大岛变小岛，再用巴氏吸管进行轻柔吹打光，靠胰酶解决团聚或重叠生长，较被动，解决这类问题较好方法是包被培养瓶辅助增强贴壁结合，更理想些。
贴壁慢、漂浮细胞多：
HeP-G2细胞传代后会有许多簇状仍处于悬浮状态，这是正常现象，一般2-3天内会缓慢粘附于培养瓶缓慢延伸进行增殖。建议传代后2-3天内减少观察和移动细胞。
当冻存管进行复苏时，HeP-G2出现大量漂浮细胞悬空，属于正常情况，刚复苏的细胞比较脆弱，建议3 天不受干扰，如果3天后漂浮物还很多，且漂浮细胞透亮圆润，可以重新收集细胞1000转离心5分钟接种到原来培养瓶。必要时可以提高血清浓度至15%辅助细胞更快贴壁增值。
空泡的形成：
气泡的形成通常是压力的迹象。造成压力的一些原因是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加了抗真菌试剂、培养基中碳酸氢钠浓度不合适、CO 2环境或培养基中的营养物耗尽等会出现这样的情况。培养条件的细微变化，特别是生长培养基中使用的 pH 和血清质量的变化，也可能影响细胞空泡的产生。
中乔新舟Hep-G2人肝癌细胞的培养条件：
87%MEM（含NEAA）（货号：ZQ-300）+10%进口胎牛血清（货号：ZQ500-S）+1% L-alanyl-L-glutamine（货号：CSP004）+1%丙酮酸钠（货号：CSP003）+1%双抗（货号：CSP006）。
倍增时间：
倍增时间：25.65 小时（PubMed= 31378681); 50-60 小时 (DSMZ)。
生长慢：
Hep-G2贴壁比较慢，按照1:2传代约3-4天可再次传代。
传代细节：
建议T25培养瓶细胞汇合度达到70-80%左右即可传代；细胞消化过程中，用手掌心拍打瓶尾部，细胞80%左右脱落，可延长消化1min左右分散团块；
注意事项：
刚复苏的冻存管建议2天后在进行观察；配置的完全培养基不能放太久，必要时可补加2mM谷氨酰胺；
上海中乔新舟生物科技有限公司
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