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细胞培养的小细节,大成就

细胞都没有绝对固定的培养条件,只是更加适合。所以在培养的时候我们需要不断的优化和改进培养方式,以便得到更好的细胞,比如在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中也很容易生长。总之,MEM是贴壁细胞最好的选择,而 RPMI-1640是悬浮细胞培养一个好的开始,当然,这是在对细胞培养条件不明确的时候的明智之举,当培养条件有标注的时候,需要按照标注的来进行,因为好的细胞会给实验带来意想不到的效果



L-谷氨酰胺和GlutaMAX-I

   L-谷氨酰胺(中乔新舟,货号:CSP012)在脱掉氨基后可作为培养细胞的能量来源、多参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,而 L-谷氨酰胺的降解会导致氨的形成,氨对细胞有毒性,故敏感细胞不建议使用。一般培养细胞建议使用GlutaMAX-I(中乔新舟,货号:CSP004),因为GlutaMAX-I 二肽溶液有最小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。


   酚红:酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。 



台盼兰怎么计数活细胞?



    用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升的细胞悬液中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,不会有任何变化,而染成蓝色的细胞就是死细胞。





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